Evaluación de la proliferación y viabilidad celular por citometría de flujo en células vero infectadas con metapneumovirus aviar (AMPV)

Las células Vero son ampliamente utilizadas en la producción de vacunas virales dependientes de células. El objetivo de este estudio fue determinar el tiempo óptimo para la obtención de una mayor cantidad de células Vero infectadas con Metapneumovirus Aviar (AMPV) que presenten una aceptable viabilidad celular.

La proliferación y viabilidad celular fueron monitoreadas en cultivo celular durante 7 días mediante Citometría de Flujo utilizando los marcadores CellTrace Violet y 7-Aminoactinomicina D (7-AAD), respectivamente. El número de copias/µl de AMPV fue cuantificado por PCR en Tiempo Real.

La proliferación celular evaluada como índice de proliferación (PI) se incrementó gradualmente desde el día 1 hasta el día 7 post-infección. Una viabilidad celular mayor al 95% fue observada durante los primeros 6 días, al séptimo día esta disminuyó al 73.7%. El mayor número de copias/µl de AMPV fue observado al día 5 post-infección.

 

Nuestros resultados sugieren que el día 6 post-infección es el tiempo óptimo para efectuar la cosecha celular de células Vero infectadas debido a que se observa un elevado número de copias/µl de AMPV, alto PI y una aceptable viabilidad celular.