1. Introducción.
La enfermedad de Newcastle y la Bronquitis Infecciosa (causada por el serotipo Massachussets), son las enfermedades aviares mas vacunadas en Holanda y el resto del mundo.
Con el desarrollo de la cepa Ma5 del serotipo Massachussets del virus de BI, Intervet, ha conseguido una cepa más inmunogénica que la H120 y en combinación con la Clone 30 confiere una buena protección contra la BI Massachussets sin influir en la protección contra la ENC. Esto ha resultado en las vacunas: Nobilis IB Ma5 y Nobilis Ma5+ Clone30.
2. Interferencia.
Luego que penetra en el Hospedero, los virus de ENC y BI se dirigen primeramente a los órganos respiratorios. Si la infección es con dos virus o mas simultáneamente, es posible que uno de ellos ocupe las células blanco primero (Células epiteliales de la traquea) y en mayor medida bloquea el acceso del otro virus a dichas células.
El que ambos antígenos de una vacuna combinada ?prendan?, depende de la capacidad de penetración de las cepas y del número de partículas virales administradas (título vacunal).
Por ende, los antígenos de una vacuna combinada deben ser inmunogénicos, en cantidad suficiente y estar bien balanceados.
3. Reacción vacunal.
La reacción postvacunal (p.v.) depende de la cepa seleccionada, infecciones secundarias (p.e.: E. coli), calidad del pollito BB y la inmunidad residual al momento de la vacunación. Con la prueba de ?Ciliostasis? es una manera de determinar la patogenecidad residual de una cepa vacunal de ENC y BI; las variaciones entre una cepa y otra dependen del tiempo de administración del virus y el momento que se produce la máxima Ciliostasis.
Luego del daño la recuperación del epitelio ciliado se produce espontáneamente.
La reacción p.v. ?pura? de Ma5/Clone 30 se produce aproximadamente a partir de los 4 días p.v, con un pico alrededor de los 8 días y se puede prolongar en caso de infecciones secundarias con E. coli.
En pollos menores de 2 semanas puede observarse mortalidad debido a infecciones primarias con E. Coli desde el primer día de edad, tanto en pollos no vacunados y sin vacunar.
4. Determinación de la inmunidad.
El examen microscópico del epitelio ciliar puede utilizarse para medir el efecto protector de una vacuna frente al desafío de un virus altamente virulento. Cuando un pollo es vacunado y luego desafiado se puede medir el epitelio ciliar si resulta dañado por el virus de desafío o protegido por el mismo, la evaluación debe hacerse cuando el virus se encuentre en su máximo efecto.
El efecto protector debe verse también en el campo.
5. Los componentes Clone 30 y Ma5/ Clone 30.
Por medio de la separación de unas subcepas virales es posible obtener una cepa ?pura?, es decir un clon. Tal cepa es más estable y uniforme. Clone 30 es un clon seleccionado a partir de la cepa La Sota. La Clone 30 fue seleccionada por su capacidad de prendimiento en presencia de inmunidad materna, en inmunogenecidad fue al menos tan buena como La Sota, y en reacción p.v. fue comparable a la cepa Hitchner B1.
La tabla 1 muestra la capacidad protectora de Clone 30 comparada con la cepa La Sota en parrilleros con inmunidad materna.
Tabla 1. Parrilleros comerciales (anticuerpos materno títulos HI 4,0) vacunados al día y desafiados a los 28 días de edad.
Clone 30 no solo es efectiva en la vacunación primaria (en casos de desafíos severos se debe utilizar desde el día de edad) sino que luego de las dosis de refuerzo, nuevamente, la respuesta es al menos tan buena como la obtenida con la vacunación con la cepa La Sota.
En un modelo estandarizado se midió la reacción vacunal y se expreso como el ?índice de reacción vacunal? o IRV.
El IRV varió de 0 (sin reacción vacunal) a 10 (máxima reacción a la vacunación) y se calculó para el período desde el día 1 al día 8 (IRV, reacción vacunal producida por la vacuna sola) así como para el período desde el día 1 al día 15 (IRV, reacción vacunal luego de una vacunación complicada por infección artificial con E coli).
Los datos presentados en la tabla 2 fueron tomados del estudio antes mencionado y muestran una comparación de los valores del IRV1 y IRV2 para Clone 30 y otras dos vacunas comerciales de ENC autorizadas en Holanda , así como los títulos HI a los 15 días luego de la vacunación por spray al primer día de edad.
Tabla 2. Reacción vacunal y respuesta inmune luego de la vacunación con vacunas vivas contra ENC.
Aquí nuevamente, Clone 30 da el título más alto con la reacción p.v. más leve.
6. Ma5.
Debido a su amplio espectro las cepas H se han utilizado para la vacunación contra BI serotipo Massachussets. Sin embargo estas cepas tienen algunas desventajas.
H52, puede ocasionar reacciones p.v. pronunciadas en aves jóvenes; cuando se administra a ponedoras antes de la postura da una buena protección en todo el periodo, pero en caso de diseminarse a aves inadecuadamente vacunadas puede producir una caída de la producción.
H120, ocasiona reacciones p.v. más suave que la H52, pero frecuentemente prende insuficientemente en presencia de inmunidad materna y la inmunidad que confiere es de corta duración (pocas semanas). Además H120 se combina pobremente con otras vacunas vivas como por ejemplo ENC, esta combinación produce incremento en las reacciones p.v. poca protección contra uno o ambos componentes.
En un estudio comparativo de un gran número de cepas y clones se selecciono un clon espontáneamente hemoaglutinante (en eritrocitos de pollo) de la cepa H+ denominado Ma5, esta cepa es menos reactiva que la H52 y más inmunogénica que la H120 y puede combinarse con una cepa vacunal de la ENC.
Con la prueba de Ciliostasis se mide la protección del virus vacunal de BI ya que se puede cuantificar en base al reaislamiento viral. Si la inmunidad es buena no se puede reaislar el virus de desafío o es aislado en menor grado.
En estudios de laboratorio se comparo Ma5 con H120 y otras vacunas tipo Massachussets y se demostró que la Ma5 otorga una alta efectividad y una baja patogenecidad residual (reacción p.v). La tabla 3 muestra la respuesta y protección en lotes vacunados y desafiados.
Tabla 3. Hallazgos concernientes a respuestas serológicas y protección luego de la vacunación y desafío*.
- Las pruebas fueron realizadas con pollos SPF.
7. La combinación.
La combinación de vacunas contra B.I. y ENC conduce a menudo a un efecto reducido de uno o ambos componentes (interferencia), resultados impredecibles y a reacciones p.v. mas intensas. Clone 30 y Ma5 fueron seleccionadas sobre su buena inmunogenecidad en presencia de inmunidad materna, mínima patogenecidad residual y bajas reacciones p.v. Posteriormente se estudio la proporción de cada una de ellas cuando se presentan en una vacuna combinada
8. Ma5/Clone 30
Numerosas parvadas de Broiler fueron vacunadas con la combinación Ma5/Clone30 evaluándose lo siguiente:
8.1 Reacción postvacunal.
Se evaluó la reacción p.v. de 22 parvadas los datos se detallan en el siguiente cuadro:
La mitad de las granjas se vacunaron al día de edad vía spray gota gruesa en planta de incubación y la otra mitad se vacunó en campo al séptimo día vía spray gota gruesa.
No se observaron diferencias en cuanto a reacciones p.v. entre las vacunaciones en estas dos edades.
Podemos concluir que las reacciones p.v. son aceptables tanto en la vacunación en campo como en la planta de incubación.
8.2 Respuesta serológica.
Se evaluaron 17 granjas a los 3, 5 días y a la edad del sacrificio con pruebas serológicas en HI para ENC y BI. El fin de esta prueba es obtener una idea de la respuesta serológica a la vacunación así como determinar la presencia de infecciones de campo.
Numerosos factores deben tenerse en cuenta con respecto a este punto:
8.2.1. El sistema inmune de los pollitos no esta completamente desarrollado. Por ejemplo: los títulos de anticuerpos en pollitos serán menores que el de aves de mas edad. Sin embargo si existe una buena protección por la inmunidad local.
8.2.2. La inmunidad materna puede interferir con el desarrollo de anticuerpos circulantes. Pero se obtiene una buena inmunidad local luego de una vacunación ocular o spray.
8.2.3. La cantidad de virus vacunal administrado codetermina el grado de prendimiento y la magnitud de los títulos de anticuerpos desarrollados posteriormente, teniendo en cuenta que las parvadas difieren en cuanto a inmunidad materna y al momento de la vacunación, es lógico que se encuentren títulos diferentes en el campo.
Con títulos HI 3 log2 o mayores se puede considerar un desafío de campo o virus circulantes de la vacuna.
En estudios se sabe que si la vacunación se realizó a los siete días con una dosis completa, Clone 30 frecuentemente presente un titulo de 3 o mayor a la edad del sacrificio.
8.3 Mortalidad.
De las 22 parvadas en estudio vacunadas con Ma5+ Clone 30 hubo una mejora disminuyendo la mortalidad en un 0.9% de 5.0 a 4.1%, en comparación a campañas anteriores
Esta es una mejora estadísticamente significativa (Wilcoxon`s Signed Rank test, two sided p <0,01).
8.4 Crecimiento por día.
En promedio el crecimiento aumento en 1.1 gramos/animal/día de 41.9 a 43.0.
8.5 Conversión alimenticia.
En promedio la conversión alimenticia a la edad del sacrificio mejoro en 0.03 de 1,89 a 1,86.
- Producción.
Comparando los resultados productivos de estas parvadas con las parvadas anteriores tenemos que en promedio los puntajes aumentaron en 11 puntos. Este aumento es estadísticamente significativo (Wilcoxon`s Signed Rank test, two sided p <0,01).
9. Discusión y Conclusión.
El desarrollo de una vacuna combinada, es con el fin de otorgar una protección (contra ambas enfermedades) de la misma manera que fueran administradas individualmente o por separado y que no produzcan reacciones p.v. más intensa.
Con la combinación Ma5 + Clone 30 todos los parámetros medidos tales como mortalidad, crecimiento/día y conversión alimenticia, mostraron una mejora sobre el usual programa de vacunación, todos estos parámetros denotaron: Mejora.
Esto resultó en un aumento notable del puntaje de producción.
10. Programa de vacunación.
Broiler.
- Primer día de edad: vacunación en planta de incubación utilizando un spray con gota gruesa o vía óculo nasal con la Nobilis NDC2 + Nobilis H120.
- 10 - 14 días de edad: vacunación en spray gota gruesa o vía óculo nasal en granja.
Nobilis Ma5+Clone 30
Futuras Ponedoras / Reproductoras.
- Primer día de edad: vacunación en planta de incubación vía spray gota gruesa u óculo nasal con la Nobilis NDC2 + Nobilis H120
- 10 - 14 días de edad: vacunación en granja (vía spray gota gruesa u óculo nasal) Nobilis Ma5+Clone 30