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Proceso de colecta y obtención de muestra seminal

Publicado: 5 de junio de 2024
Por: David Leonardo Gómez López, María de los Ángeles Cortés Escobar, Juan Felipe Martínez Rocha. Agrosavia
Para la toma de muestra del material seminal se pueden emplear dos equipos muy conocidos: i) vagina artificial (figura 7a) o ii) electroeyaculador (figura 7b). La  elección  entre  estos  dos  métodos  depende  de  la  evaluación  de  varios  aspectos, como edad, temperamento y experiencia del toro donador, utilización de  vacas  en  celo,  disponibilidad  de  los  equipos  e  infraestructura,  y  nivel  de  entrenamiento del personal que lleva a cabo la colecta.
Figura 7. Equipos para la toma de muestra del material seminal. a. Vagina artificial; b. Electroeyaculador. Fotos: David Leonardo Gómez López
Figura 7. Equipos para la toma de muestra del material seminal. a. Vagina artificial; b. Electroeyaculador. Fotos: David Leonardo Gómez López
El método de colecta con vagina artificial permite al toro donador realizar una simulación del apareamiento natural (figura 8) y es utilizado en varias especies animales ya que requiere un equipa-miento simple.
Figura 8. Colecta con vagina artificial. Foto: Banco de fotos de agrosavia
Figura 8. Colecta con vagina artificial. Foto: Banco de fotos de agrosavia
Se utiliza una vaca maniquí para que el toro donador experimente un apareamiento natural.Al realizar la monta, el animal se sostiene en sus miembros posteriores, y con los anteriores abraza el tren posterior de la hembra para luego dirigir el pene erecto hacia la abertura de la vagina artificial y de esta manera llevar a cabo el proceso de eyaculación.
Este método permite obtener muestras seminales (figura 9) con una alta motilidad y  viabilidad  espermática.  Adicionalmente,  el  toro  donante  experimenta  estrés  mínimo con la vagina artificial, lo que contribuye a su bienestar y hace que este sea el método preferido por el lra.
Figura 9. Muestra de eyaculado del semen bovino tomada con vagina artificial. Foto: Banco de fotos de agrosavia
Figura 9. Muestra de eyaculado del semen bovino tomada con vagina artificial.Foto: Banco de fotos de agrosavia
Por otra parte, el método de electroeyaculación permite realizar colectas de semen en un menor tiempo y no requiere de hembras en celo ni pues-tos de monta para su implementación. Se utiliza sobre todo cuando los animales para colecta son poco dóciles o cuando presentan algún problema fisiológico o anatómico para realizar la monta (por ejemplo, toros difíciles de acostumbrar a la vagina artificial, que representan un riesgo para el personal que los maneja por su temperamento nervioso o que tienen baja libido).
El electroeyaculador cuenta con un transductor que estimula las glándulas seminales por medio de impulsos eléctricos provenientes de una fuente de energía (figura 10a). La eyaculación se da en un proceso bifásico: primero ocurre la emisión de impulsos eléctricos de bajo voltaje y amperaje, luego sigue la erección peneana, y finalmente se produce la eyaculación (figura 10b).
Figura 10. Colecta con electroeyaculador. a. Sonda rectal; b. Cono de colecta con la muestra seminal. Fotos: David Leonardo Gómez López
Figura 10. Colecta con electroeyaculador. a. Sonda rectal; b. Cono de colecta con la muestra seminal. Fotos: David Leonardo Gómez López
Cuando se produce la estimulación adecuada, esta viaja vía nervio pudendo interno hacia los centros lumbosacros de la columna vertebral; desde allí parte la respuesta vía nervios simpáticos lumbares, lo cual estimula la contracción de la musculatura lisa (que recubre próstata, glándulas vesiculares y conductos deferentes) y asegura la progresión de la masa espermática hacia la uretra pélvica. Asimismo, la respuesta nerviosa viaja vía nervios parasimpáticos para provocar la  contracción  de  la  musculatura  estriada  del  tracto  uretral  (músculo  isquiocavernoso,  bulbo  esponjoso y uretral), lo cual resulta en la erección del pene y finalmente en la eyaculación.
La  muestra  obtenida  siempre  debe  protegerse  de  la  luz  e  inicialmente  mantenerse  a  una  temperatura de 32 a 34 °C para luego continuar con su evaluación macro y microscópica.
El procedimiento con el electroeyaculador debe llevarlo a cabo solo personal con entrenamiento adecuado, siempre en la forma más apropiada y con la menor estimulación eléctrica, para afectar lo menos posible el bienestar animal.

Evaluación macro y microscópica  de la muestra seminal

Una vez obtenido el eyaculado, se recomienda tomar dos muestras de semen puro  homogeneizado  (< 0,5  mL)  en  viales  de  microcentrífuga  debidamente  identificados para realizar los análisis microscópicos en fresco y en campo. En caso de no contar con un densímetro o cámara de Neubauer para medir la concentración espermática una vez colectada la muestra en campo, uno de los viales debe ser remitido al laboratorio con el fin de medir la concentración del eyaculado (figura 2b), mientras que el otro vial se puede utilizar para el análisis de motilidad masal e individual del semen fresco en campo.
A continuación, se detallan los criterios de aceptación recomendados durante la evaluación macro y microscópica de muestras de semen fresco bovino.
Tabla 2. Evaluación macroscópica
Tabla 2. Evaluación macroscópica
Tabla 3. Evaluación microscópica
Tabla 3. Evaluación microscópica

Dilución de la muestra seminal

Antes de colectar el material seminal, el diluyente debe estar preparado y ser llevado a temperatura de 32 a 34 °C.
¡Importante! Todas las diluciones que se requieran deben hacerse a la misma temperatura.
Inicialmente, después de obtenida la muestra,se debe realizar una dilución 1:1 (figura 11). Transcurridos cinco minutos, dependiendo de la  concentración  espermática  del  eyaculado  medida o estimada, se puede agregar una o dos  porciones  más  del  medio  diluyente,  de  tal forma que la dilución final de envío sea de 1:2  o  1:3,  es  decir,  una  parte  de  semen  por  dos o tres del medio diluyente.
Figura 11. Dilución de la muestra bovina de material seminal con diluyente sintético en proporción 1:1. Foto: David Leonardo Gómez López
Figura 11. Dilución de la muestra bovina de material seminal con diluyente sintético en proporción 1:1.Foto: David Leonardo Gómez López
¡Importante! El recipiente de la muestra seminal diluida debe estar debidamente rotulado con la identificación del toro donador y número del eyaculado. Una vez marcado, se debe iniciar con el descenso de temperatura.

Enfriamiento de la muestra seminal diluida

Para  realizar  el  descenso  de  la  temperatura,  se  puede  utilizar  uno  de  los  siguientes elementos: i) una nevera en el compartimiento de refrigeración o ii) una cava de icopor de transporte con bolsas de gel congeladas.
Se pone el recipiente con la muestra seminal diluida dentro de un vaso con agua  a  la  misma  temperatura  (32  a  34°C)  y  se  guarda  en  el  refrigerador  (figura 12a) o en la cava de icopor (figura 12b) tapada. Al cabo de una hora y media, la temperatura deberá descender al rango de refrigeración, es decir, de 2 a 8 °C. El recipiente debe mantenerse a esta temperatura por un tiempo máximo de 16 horas, hasta su procesamiento en laboratorio.
Figura 12. Ejemplo de recipientes para iniciar descenso de temperatura con la muestra seminal. a. Nevera en el compartimiento de refrigeración; b. Cava de icopor de transporte con geles refrigerantes. Fotos: David Leonardo Gómez López
Figura 12.Ejemplo de recipientes para iniciar descenso de temperatura con la muestra seminal. a. Nevera en el compartimiento de refrigeración; b. Cava de icopor de transporte con geles refrigerantes. Fotos: David Leonardo Gómez López
4° Capítulo del manual  (2023). Guía de manejo del semen bovino durante su colecta y envío para la criopreservación de pajillas seminales. Corporación Colombiana de Investigación Agropecuaria (agrosavia).   https://doi.org/10.21930/agrosavia.analisis.7406436

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Maydier Norman Horrach Junco
15 de agosto de 2024
Saludos. Alguien de los colegas utiliza el analizador de esperma HC-BO28V necesito hacer una consulta por un problema que me está dando el equipo. Por favor compartir.
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