Que métodos son utilizados para extraer diferentes tipos de micotoxinas y determinarlas o por cromatografía gaseosa con ECD o HPLC con UV o detectores de fluorescencia.
Muchas Gracias desde ya por colaborar.
Saludos
Estimado Julián,un método es la aplicación de columnas de inmunoafinidad para la preparación de muestras previo al análisis de aflatoxinas por HPLC.
Las aflatoxinas son sustancias peligrosas y se debe tener BPL actualizado, las columnas contienen 0.01% de timerosal, no deben congelarse,mantener entre 2-8ºC y que contengan búffer por encima de la columna (temperaturas extremas y/o cambio de pH desnaturaliza la columna de inmunoafinidad).
Descontaminación: todo el material utilizado se debe descontaminar sumergiéndolos por lo menos 30 minutos en hipoclorito (5% p/p), seguido de una adición de acetona(5% v) por 30 minutos, luego enjuague exhaustivo con agua destilada y a las jeringas con metanol y agua destilada al final de cada ensayo.Importante:las aflatoxinas se absorben fácilmente en superficies de vidrio, reduciendo la recuperación de las aflatoxinas de cada muestra. Por ello se recomienda que el material que entre en contacto con soluciones de aflatoxinas, se sumerjan en solución de SO4H2 2 mol/l por varias horas y luego enjuagar con agua destilada para remover trazas de ácido.
Es posible utilizar diferentes solventes para la extracción como metanol para aflatoxinas en cereales, nueces y con acetonitrilo para frutas secas y especias. Extracción con metanol: 50 g de muestra y 4 g de ClNa en recipiente para licuar de 1l de capacidad y resistente al solvente. Agregar 250 ml de metanol:agua (60:40 v/v) calidad HPLC en el recipiente, tapar y licuar por 1 min a alta velocidad.
Diluir el extracto con 250 ml de agua destilada.Mezclar bien por agitación y filtrar 25-50 ml por filtro Whatman Nº4 o 113 y transferir 10 ml del filtrado (equivale a 1 g de muestra) a un cuerpo de jeringa de vidrio para pasar por la columna de inmunoafinidad.
Ajustar firmemente la columna y pasar 2-3 ml/min, con una pequeña presión continua para la captura de aflatoxinas por el anticuerpo.
La sensibilidad depende del sistema de detección empleado por el analista.-
Saludos cordiales Salamone Hector Daniel.-
Estimado Julián:
Se puede desarrollar un procedimiento de extracción de Ocratoxina A, utilizando columnas C18 SPE el cual permite obtener un porcentaje de recuperabilidad entre del 90 a 95 [percent] .Es necesario saber la matriz biológica de donde tu quieres extraer esta micotoxinas para optimizar el uso de estas columnas.
HOLA QUISIERA SABER CON QUE METODO EN LABORATORIOSE PUEDE DETERMINAR EL NIVEL DE TRICOTECENO T-2 EN EXPELLER DE SOJA PARA SEGURIDAD ALIMENTICIA EN ANIMALES.
ESPERANDO RESPUESTA
SALUDOS CORDIALES
ANDRES
Hola me gustaria saber quien si alguno ha tenido experiencia usando la metodologia de fluorescencia polarizada de Diachemix para determinar Aflatoxina, Fum o DON??? Atte Datty
Recomendar
Responder
1
¿Quieres comentar sobre otro tema? Crea una nueva publicación para dialogar con expertos de la comunidad.